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FZ014BF2 創(chuàng )傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 48test

英文名稱(chēng):PCR Detection Kit for Vibriovulnificus(Fluorescent Probe Assays)

貨 號 :FZ014BF2

規 格 :48測試/盒

用途:用于食品中創(chuàng )傷弧菌的檢測

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商品詳細
說(shuō)明書(shū)
微生物圖冊
行業(yè)應用
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產(chǎn)品名稱(chēng):創(chuàng )傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )ǎ?/strong>
英文名稱(chēng):PCR Detection Kit for Vibriovulnificus(Fluorescent Probe Assays)

產(chǎn)品編號與包裝規格:

編號 規格
FZ014BF248 測試/盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:本試劑盒適用于食品中創(chuàng )傷弧菌的檢測。

檢測原理:基于Real Time PCR技術(shù),利用針對于創(chuàng )傷弧菌特異性基因的引物、熒光探針以及其他反應所需試劑,加入待檢樣品即可進(jìn)行擴增反應。在發(fā)生擴增過(guò)程中,熒光探針與目的基因片段結合,可被Taq酶分解并產(chǎn)生熒光信號,此時(shí)熒光定量PCR儀可識別該熒光信號,同時(shí)根據其強弱變化繪制出相應的實(shí)時(shí)擴增曲線(xiàn),進(jìn)而判定創(chuàng )傷弧菌是否檢出。

創(chuàng )傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?產(chǎn)品組分:

創(chuàng  )傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?產(chǎn)品組分

儲存條件與保質(zhì)期:-20℃儲存,有效期為12個(gè)月,避免反復凍融。

靈敏度:最低檢驗限達到 100 CFU/Test

所需其他材料和適用儀器:熒光定量PCR儀(具有能夠檢測FAM標記的熒光通道)、高速離心機、移液器、移液槍頭及離心管等。

創(chuàng )傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?使用指南:

1,樣品前處理

   1) 樣品增菌液模板 DNA 的制備:
         a) 樣品增菌:參照NMKLNo.156《食品中致病性弧菌的檢測和計數》,取樣品20 g(mL),加入到盛有200 mL含3%氯化鈉堿性蛋白胨水的無(wú)菌容器中均質(zhì),42±1℃培養18-24 h;
         b) 吸增菌液1 mL到1.5 mL規格的無(wú)菌離心管中,6000 r/min離心5 min,棄上清,用50 μL無(wú)菌超純水懸浮洗滌沉淀1-2次,6000 r/min離心5 min,完全去除上清;
         c) 加入30 μL裂解液,充分懸浮菌體,輕彈管壁消除氣泡,99℃加熱10 min;
         d) 12000 r/min離心15 min,上清即為粗提的DNA,可轉移至0.2 mL無(wú)菌離心管中,在-20℃下可長(cháng)期保存。

   2) 可疑菌落模板 DNA 的制備:挑取可疑菌落,充分懸浮于預先加有30 μL裂解液的無(wú)菌離心管中,后按照上述步驟c)、d)操作。

2, 加樣、反應

   1) 按照需求取n個(gè)PCR反應管(n=1管陰性對照+待檢測樣品數+1管陽(yáng)性對照),從試劑盒中取出預混液,充分融化,渦旋后短暫離心,以上每管加入20 μL預混液,待用。
   2) 向上述n個(gè)反應管中分別加入陰性對照、待測樣品DNA、陽(yáng)性對照各5 μL,蓋緊管蓋,短暫離心,立即進(jìn)行PCR擴增反應。
   3) PCR反應體系為25 μL,取FAM檢測通道,在反應階段2中60℃時(shí)收集熒光信號,具體程序如下:

反應階段 溫度 時(shí)間 信號收集 循環(huán)數
195°C30 sec 1
295°C5 sec } 40
60°C30 sec?
   注:在反應階段2中60℃時(shí)收集熒光信號,對于多通道熒光PCR儀,取熒光素“FAM”為信號采集通道,淬滅基團選擇“None”,染料校正選擇“None”。

3, 結果:一般情況下,可通過(guò)軟件自動(dòng)設定的基線(xiàn)、閾值等直接讀取檢測結果。如需調整,可根據所使用儀器的自身情況(如噪聲等)以及選取的不同熒光通道進(jìn)行調整。

   1) 質(zhì)量控制:陰性對照未出現明顯的S型擴增曲線(xiàn)或Ct值>35,陽(yáng)性對照出現S型擴增曲線(xiàn)且其Ct值<30。若陰陽(yáng)性對照不同時(shí)滿(mǎn)足上述條件,則本次檢測結果無(wú)效,應重新檢測或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系。

   2) 結果判讀:(根據反應所得Ct值判讀,具體見(jiàn)下表:)

Ct值 結果判讀
≤35

創(chuàng )傷弧菌陽(yáng)性。

35~37建議重新檢測,若結果Ct≥37,則創(chuàng )傷弧菌陰性,反之則為創(chuàng )傷弧菌陽(yáng)性。
≥37創(chuàng )傷弧菌陰性。

更多實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒(食源性致病菌檢測系列) 產(chǎn)品列表:

貨號 產(chǎn)品名稱(chēng) 用途
FZ015BF2嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于飲用水、非飲用水、公共場(chǎng)所環(huán)境樣本中嗜肺軍團菌的檢測
FZ016BF2唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 于食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的定性檢測
FZ017BF2大腸埃希氏菌志賀毒素核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中致病性大腸埃希氏菌(STEC)產(chǎn)志賀毒素類(lèi)型的定性檢測
FZ001BF2銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 包裝飲用水等水體中銅綠假單胞菌的定性檢測
FZ002BF2糞鏈球菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 包裝飲用水等水體中糞鏈球菌(EF)的定性檢測
FZ003BF2產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品和水體中產(chǎn)氣莢膜梭菌的定性檢測
FZ004BF2金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品樣本或可疑菌落中金黃色葡萄球菌的檢測
FZ005BF2沙門(mén)氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中沙門(mén)氏菌的檢測
FZ006BF2志賀氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中志賀氏菌的定性檢測
FZ007BF2單增李斯特氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中單增李斯特氏菌的檢測
FZ008BF2溶血性弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中副溶血性弧菌的定性檢測
FZ009BF2大腸埃希氏菌O157:H7核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中大腸埃希氏菌O157:H7 的檢測
FZ010BF2阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中阪崎克羅諾桿菌的檢測
FZ011BF2小腸結腸炎耶爾森氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中小腸結腸炎耶爾森氏菌的檢測
FZ012BF2布魯氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品中布魯氏菌的檢測
FZ013BF2溶藻弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 用于食品、水產(chǎn)樣本中溶藻弧菌的檢測

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